杨桃果总黄酮对大鼠血压的影响

目的：观察杨桃果总黄酮（ACFTF）对正常大鼠和NG-硝基-L-精氨酸甲酯（L-NAME）致高血压大鼠血压的影响。方法：制备杨桃果总黄酮，分别用颈总动脉插管法连接MPA多媒体生物信号记录系统测定正常大鼠和ALC-nibp无创尾动脉压测量分析系统测定L-NAME致高血压大鼠，观察杨桃果总黄酮低、中、高（300、600、1 200mg·kg-1·d-1）3个剂量组对大鼠给药前和给药后血压的影响。结果：在正常大鼠实验中，与空白对照组比较，高、中、低剂量3个给药组均在20min出现最大降压，SBP、DBP和MBP值有显著性差异（P<0.05，P<0.01）。在高血压大鼠实验中，与模型组比较，高剂量组和中剂量组第2周血压明显降低（P<0.05），低剂量组和中剂量组在第3周血压明显降低（P<0.05）。

结论：杨桃果总黄酮中含有降血压活性成分，能降低正常大鼠和L-NAME致高血压大鼠的血压。

关键词：高血压；黄酮；杨桃；大鼠；NG-硝基-L-精氨酸甲酯

基金资助：国家自然科学基金项目（No.81560587）

1.引言

杨桃（Averrhoacarambola L.）属于热带常绿乔木，在广西、广东、云南和福建等地区资源丰富，其根、叶、果实都具有良好的药用价值，杨桃根多糖具有抗氧化作用，对由紫外线导致损伤的人角质细胞有保护作用[1-4]，杨桃叶总黄酮和杨桃根含有降低糖尿病小鼠血糖的成分[5-6]。杨桃果实为酢浆草科植物的新鲜果实，在广西民间用来治疗高血压病。目前，关于其降压作用的量效与时效关系研究报告尚不多见。本文就杨桃果实提取物对正常大鼠和NG-硝基-L-精氨酸甲酯（L-NAME）致高血压大鼠血压的影响进行研究，对于杨桃的进一步开发利用有着极为重要的意义。

2.材料

2.1. 动物

选用SPF级Wistar大鼠100只，体质量（200±20）g，雌雄各半，由广西医科大学实验动物中心提供。每笼5只，自由取水，明、暗各12h，所有大鼠先饲养1周适应环境。动物生产许可证：SCXK（桂）2014-0002；动物使用许可证：SYXK（桂）2014-0003。

2.2. 药物与试剂

杨桃果总黄酮（ACFTF）由本校药理学教研室提供；卡托普利，汕头金石制药总厂，批号：140708；L-NAME：东京化成工业株式会社，日本，批号：257-116-1；水合氯醛，成都市科龙化工试剂厂，批号：2014031101；肝素钠，天津市生物化学制药厂，批号：20150501。

2.3. 仪器

ALC-V9动物呼吸机：上海奥尔科特生物科技有限公司；ALC BIO MBPA心功能分析系统：上海奥尔科特生物科技有限公司；ALC-nibp无创尾动脉压测量分析系统：上海奥尔科特生物科技有限公司。

3.方法

3.1. ACFTF对正常大鼠血压的影响

Wistar大鼠以4%水合氯醛（400mg/kg）腹腔注射麻醉，固定，剪开颈部正中皮肤，分离肌肉，游离出右侧颈总动脉，结扎远心端，用动脉夹阻断近心端，在被阻断的动脉减V小口，插入充满10%肝素的动脉插管连接压力换能器。剪开大鼠上腹部皮肤和皮下组织，打开腹腔暴露十二指肠，以备给药。通过MPA心功能分析系统，记录收缩压（systolic blood pressure，SBP）、舒张压（diastolic blood pressure，DBP）和平均动脉压（mean blood pressure，MBP），待血压稳定30min，记录血压值，通过十二指肠分别给予0.9%氯化钠溶液，ACFTF低、中、高剂量（300、600、1 200mg/kg），并观察各组（空白对照组，ACFTF低、中、高剂量组）给药后1、5、
10、20、60、90、120、180min时血压的变化。

3.2. ACFTF对高血压大鼠血压的影响

Wistar大鼠灌胃给予造模药一氧化氮合酶抑制剂（50mg·kg-1·d-1），连续给药4周，复制高血压模型。造模成功后筛选出的50只大鼠，按随机数字表法分为5组，即ACFTF低剂量组（300mg·kg-1·d-1）、ACFTF中剂量组（600mg·kg-1·d-1）、ACFTF高剂量组（1 200mg·kg-1·d-1），卡托普利组（10mg·kg-1·d-1），模型对照组每组10只。另取10只正常Wistar大鼠作为空白对照组。按照体质量于每日固定时间灌胃给药1次，连续给药5周，空白对照组及模型组给予等容积的蒸馏水。每周于固定时间用ALC-nibl无创尾动脉压测定系统测定清醒Wistar大鼠的尾动脉压，选择SBP和DBP值接近的3次测定结果，取其平均值。

3.3. 统计学方法

采用SPSS 16.0统计学软件进行统计学处理，计量资料以x-±s表示，给药前后的比较采用配对t检验，多组均数比较的计量资料采用方差分析，以α=0.05为检验水准，以P<0.05为差异有统计学意义。

4.结果

4.1. ACFTF对正常大鼠血压的影响

见表1。十二指肠给药后5min出现降压作用，ACFTF高、中、低剂量组均在20min出现最大降压，SBP、DBP和MBP值与空白对照组比较有显著性差异（P<0.05，P<0.01），其中ACFTF高剂量组下降幅度最大，达到3kPa且能持续40min。ACFTF各剂量组均能剂量依赖性的降低SBP、DBP和MBP值。给药后120min各组血压逐渐上升。

4.2. ACFTF对高血压大鼠血压的影响

见表2。连续给药5周，与空白对照组比较，模型组大鼠SBP、DBP和MBP值均显著升高（P<0.01），造模成功；与模型组比较，各剂量组血压均有不同程度下降，ACFTF高、中剂量组在给药第2周后血压出现下降趋势（P<0.05），其中，ACFTF高剂量组第3周开始血压维持在一个较稳定的水平。ACFTF低剂量组在给药后第3周其血压开始有下降的趋势（P<0.05）。

5.讨论

高血压病是危害人类健康的常见心血管疾病，由遗传、行为和环境等多因素共同作用的复杂性疾病。据统计，以高血压为原发病的各种心脑血管疾病已经成为人类死因之首。血压的升高、病程的延长，危险因素随之增多，易造成靶器官的损伤，包括脑、心脏和肾脏。尤其容易导致心室肥厚、动脉粥样硬化和卒中等并发症。在治疗时应当对血压进行早期干预治疗控制[7-9]。

血管内皮作为循环血液与血管平滑肌之间的机械屏障，具有血管收缩舒张、分泌血管活性物质及接受、传递信息等功能。血管内皮来源的NO产生后，能迅速从内皮扩散到血管平滑肌细胞，使鸟苷酸环化酶激活，细胞内环磷酸鸟苷浓度增加，导致平滑肌细胞松弛，对维持机体血压平衡有重要的作用。长期给于竞争性NO合酶抑制剂L-NAME可抑制NO的成和释放，导致血管持续收缩，致大鼠产生高血压，是筛选降压药常用的理想动物模型之一。其对降压药物的选择与高血压患者相似，常用来评价抗高血压药物的药效[10-13]。研究结果显示杨桃果总黄酮对两种大鼠的血压有不同程度的降低作用。在急性降压实验中观察到十二指肠注射四方寄生茶后，Wistar大鼠很快出现了降压的效应，最大降压效应出现在给药第20分钟，降压持续的时间较短，给药2h左右血压开始回升。慢性降压实验结果显示ACFTF各剂量组血压均有不同程度下降，ACFTF高、中剂量组在给药第2周后血压出现下降趋势，ACFTF低剂量组在给药后第3周其血压也开始有下降的趋势。其中ACFTF高剂量组第3周开始血压维持在一个较稳定的水平。各个剂量组的降压效应呈现明显的剂量依赖性，且没有明显的性别差异性。本实验提示杨桃果总黄酮中含有降血压作用的活性成分。

研究发现杨桃果中还含有糖类、多酚、皂苷、维生素以及微量元素等营养物质，这些物质是否有降压的作用，且其量效和时效特点的差异也是值得探究的问题。本课题组将进一步探究分离筛选其有效成分和其作用的通路机制，为今后杨桃的开发利用提供实验基础和理论依据。

6.参考文献

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摘要